Determinación del porcentaje de inhibición germinadora de hojas de Citrus limonum risso hacia semillas de Raphanus sativus a partir de la actividad alelopática del Eucalyptus spp

Valeria Torres Antuna

tova.2002@yahoo.com

Resumen

La alelopatía juega un papel de gran importancia al momento de conocer la forma de interacción entre plantas, pues esto tiene aplicación en la agricultura. Se sabe que el Eucalyptus es una de las especies más conocidas por poseer potencial alelopático. Dentro de la literatura estudiada no se encontraron tantos indicios señalando que Citrus limonum risso tuviera aleloquímicos, por lo que surgió el interés de investigar el efecto alelopático de esta especie sobre semillas de Raphanus sativus, la cual tiene importancia de producción en México. Para esto se realizaron tres cultivos; tratamiento testigo (porcentaje de crecimiento de semillas de rábano a condiciones normales), tratamiento con extracto de hojas de Eucalyptus al 26% (medio de comparación sobre potencial alelopático) y tratamiento con extracto de hojas de Citrus limonum risso al 26% (especie a investigar).

            Se obtuvo que la actividad alelopática de las hojas de Citrus limonum risso funcionan también como componentes alelopáticos inhibiendo la germinación de la semilla de Raphanus sativus en un 96.667% a una concentración del 26% de hojas, obteniendo un efecto similar producido por el extracto de Eucalyptus. Este conocimiento podrá servir para realizar investigaciones en campo que ayuden a decretar la relación entre estas dos especies y fomentar un sistema que no interfiera en la producción de R. sativus.

            Palabras clave: Alelopatía, aleloquímicos, Citrus limonum risso, Raphanus sativus, cultivo, metabolitos secundarios.

 

Abstract

Allelopathy plays a role of great importance when knowing the way of interaction between plants, as this has application in agriculture. Eucalyptus is known to be one of the species best known for having allelopathic potential. Within the literature studied, not so many indications were found indicating that Citrus limonum risso had allelochemicals, so the interest arose to investigate the allelopathic effect of this species on Raphanus sativus seeds, which is of production importance in Mexico. For this, three crops were made; control treatment (percentage of radish seed growth under normal conditions), treatment with 26% Eucalyptus leaf extract (comparison medium on allelopathic potential) and treatment with 26% Citrus limonum risso leaf extract (species to be investigated).

The allelopathic activity of the leaves of Citrus limonum risso was also found to function as allelopathic components, inhibiting the germination of Raphanus sativus seed by 96,667% at a concentration of 26% of leaves, obtaining a similar effect produced by the Eucalyptus extract. This knowledge can be used to carry out field investigations that help to decree the relationship between these two species and promote a system that does not interfere with the production of R. sativus.

Key words: Allelopathy, allelochemicals, Citrus limonum risso, Raphanus sativus, culture, secondary metabolites.

 

Introducción

Todos los organismos vivos llevan a cabo el metabolismo (primario) para poder vivir, sin embargo, las plantas llevan un segundo metabolismo, cuyos productos son nombrados metabolitos secundarios y desempeñan distintas funciones. El término “alelopatía” se refiere a cualquier proceso que involucre metabolitos secundarios producidos por plantas, algas, bacterias y hongos que influencien el desarrollo de la agricultura y sistemas biológicos (Reigosa et al., 2006). Los metabolitos secundarios que producen la alelopatía son denominados aleloquímicos, y dentro de los más comunes se encuentran las cuamarinas, los flavonoides, taninos, terpenos, derivados de quinonas, entre otros (Chludil, 2017). Estos pueden ser liberados de la planta por cuatro maneras; descomposición de residuos vegetales, liberación de compuestos volátiles, lixiviación por agua de lluvia y exudación por raíces (Ballester et al., 2011).

Actualmente se realizan investigaciones cuyo objetivo es obtener fórmulas de moléculas alelopáticas base, para partiendo de esto modificarlas y conseguir herbicidas que favorezcan el control de malezas en la agricultura y no sean nocivos hacia el medio ambiente, sin embargo, investigaciones de este tipo han sido limitadas debido a su alta complejidad. Otra línea de investigación es la forma de interacción entre dos especies para determinar un sistema agroforestal y poder aplicar métodos que eviten una interferencia en el desarrollo de cultivos dentro de la agricultura.

Se ha determinado que los aleloquímicos son metabolitos secundarios encontrados en plantas capaces de inhibir el crecimiento de otros organismos, entre las especies más destacadas con este mecanismo se encuentra el Eucalyptus, y entre las menos reportadas el C. limonum risso, partiendo de esto surge la inquietud personal por indagar sobre esta última especie. El objetivo de la presente investigación es determinar su actividad alelopática hacia Raphanus sativus, comúnmente conocido como rábano. Como hipótesis se establece que, si se aplica una extracción de metabolitos secundarios de C. limonum risso, a una concentración de hojas del 26% se espera que aproximadamente el 65% de las semillas de R. saitvus no germinen.

 

Método

Primeramente, se realizó un corte longitudinal a tres envases de tetra-pak, obteniendo así un contenedor para el cultivo de las semillas de Raphanus. sativus. Posteriormente a cada uno de los tres contenedores se le añadieron 15gr de agrolita. En cada uno se distribuyeron uniformemente 30 semillas de R. sativus y luego fueron cubiertas por otros 7.5gr de agrolita. Con ayuda de un marcador, a un contenedor se le asignó la letra “G”, a otro “L” y “E”, pues cada uno consistiría de un tratamiento diferente. La tabla 1 muestra los tratamientos llevados a cabo por día de regado.

 

Tratamiento testigo (“G”)

Tratamiento de C. limonum risso (“L”)

Tratamiento de Eucalyptus (“E”)

Regado con:

100ml de agua potable.

Extracto obtenido de la tamización de la trituración de 26gr hojas de limón real junto con 100ml de agua destilada.

Extracto obtenido de la tamización de la trituración de 26gr hojas de eucalipto junto con 100ml de agua destilada.

Tabla 1: Tratamientos de la experimentación por día de regado.

            El tratamiento testigo sirvió para obtener el promedio de germinación de semillas de rábano a condiciones normales. El tratamiento con extracto de Eucalyptus se realizó para tener un punto de comparación, ya que está comprobado que esta especie posee aleloquímicos. El tratamiento con extracto de C. limonum risso fue el que se probó. La concentración de hojas en el extracto para estos dos últimos tratamientos fue de 26%.

El proceso de irrigación se dividió en dos fases; en la primera se regó cada 48 horas y abarcó quince días, mientras que la segunda inició al término de la primera y se efectuó cada 72 horas con una duración de 9 días. Durante el desarrollo del experimento se mantuvo una temperatura que osciló entre 18°C - 22°C y se registró la cantidad de semillas que fueron germinando diariamente.

 

Resultados

Durante los primeros cinco días no se observaron cambios en ninguno de los tres cultivos llevados a cabo, hasta el sexto día, cuando se identificó el crecimiento de dos plántulas de rábano en el tratamiento testigo, mientras que los otros dos medios de cultivo se mantuvieron con la ausencia de estos.

            Al séptimo día se observaron en el tratamiento testigo regado con agua potable cinco nuevos brotes, obteniendo así un total de siete plántulas. En el octavo día se observaron 24 retoños totales, al siguiente se encontraron tres nuevos brotes (27 plántulas totales. La germinación total de las semillas de R. sativus en el tratamiento testigo ocurrió en el décimo día.

Mientras tanto, el tratamiento regado con extracto acuoso de C. limonum risso presentó el crecimiento de una plántula de R. sativus hasta el décimo día, sin embargo, ninguna otra semilla germinó después de este evento, por lo tanto, se establece que solamente el 3.333% del cultivo tuvo capacidad de crecimiento hasta el día número 21.

En el cultivo tratado con extracto de Eucalyptus spp se mostró una inhibición de germinación hacia R. sativus del 100%, pues durante 21 días no se observó el crecimiento de ninguna plántula.

            El siguiente gráfico (gráfico 1) permite realizar una comparación entre el número de semillas germinadas en los tres tratamientos realizados, donde se puede observar que la germinación en C. limonum risso fue mayor que la del cultivo donde intervino el Eucalyptus.

Figura 1

 

Número de semillas germinadas de Raphanua Sativus. Fuente: Elaboración propia

 

Discusión de Resultados

Se presentó un gran potencial alelopático de Eucalyptus, ya que inhibió el 100% de la germinación de R. sativus, lo cual concuerda con el análisis realizado por Ballester et al. (2011), pues de igual manera se halló una capacidad alelopática sobresaliente en esta especie. También coincide con las conclusiones obtenidas por Silva et. al (2017), quienes usando la hojarasca determinaron una alta inhibición de esta especie hacia pastizales.

            Mientras tanto, las hojas de C. limonum risso mostraron un 96.667% de actividad inhibitoria de crecimiento hacia semillas de R. sativus en una concentración del 26%. Calle (2010), encontró mediante cromatografía de gases que los compuestos principales involucrados en este proceso son el geraniol, limoneno y β-pineno pertenecientes al grupo de terpenos y subgrupo de monoterpenos oxigenados e hidrogenados presentes en las hojas del árbol de limón real.

            C. limonum risso, perteneciente al género Citrus, mostró una alta actividad alelopática, al igual que el naranjo (Citrus sinesis) según Calle (2010), a partir de lo que podría inferirse que existe un potencial alelopático en este género, sin embargo, se debe considerar que esta clasificación es muy amplia y que no todos pueden tener esta propiedad, por lo deben continuar La importancia de saber esto radica en que la producción de R. sativus es relevante, pues según el gobierno mexicano, el país exportó 37mil 571 toneladas de rábano en 2017 (Servicio de Información Agroalimentaria y Pesquera, 2018). Además, C. limonum risso ocupa el cuarto lugar de importancia de cítricos a nivel mundial, produciendo más de 4,400,000 toneladas (Manera, 2004), entonces, el conocimiento de la relación entre estas dos especies puede ser pauta para establecer criterios en el manejo de sembradíos, pues si son cultivadas de forma adyacente, los aleloquímicos de C. limonum risso pueden llegar provocar una inhibición o retraso en el crecimiento de R. sativus, lo cual tendría un impacto negativo en la producción de esta hortaliza. 

Ahora bien, de acuerdo la hipótesis establecida previamente, efectivamente el tratamiento con C. limonum risso tuvo un porcentaje de inhibición de germinación mayor a 65% (valor esperado), mostrando menos brotes que el tratamiento testigo, pero más que los producidos por el efecto alelopático del Eucalyptus (100% de inhibición).

 

Conclusiones

Esta es la primera investigación que prueba el efecto alelopático entre estas dos especies, mostrando un efecto positivo que puede ser aplicado en la agricultura.

Se establece que la actividad alelopática de las hojas de Citrus limonum risso funcionan también como componentes alelopáticos inhibiendo la germinación de la semilla de Raphanus sativus en un 96.667% a una concentración del 26% de hojas, obteniendo un efecto similar producido por el extracto de Eucalyptus. Este conocimiento podrá servir para realizar investigaciones en campo que ayuden a decretar la relación entre estas dos especies y fomentar un sistema que no interfiera en la producción de R. sativus.

       No obstante, aunque se ha atribuido esta actividad a varios compuestos, todavía se requiere mayor indagación e identificación de la estructura de otros más, para así poder tomarlas como base, modificarlas y hacer uso de estas en aplicación de herbicidas no perjudiciales hacia el medio ambiente. Además, con las estructuras se podría llegar a comprender el mecanismo de acción concreto de los aleloquímicos sobre plantas receptoras.

 

 

Referencias

Avila, L., Murillo, W., Durango, E., Torres, F., Quiñones, W., & Echeverri, F. (2007). Efectos alelopáticos diferenciales de extractos de eucalipto. Scientia et technica, vol.13, no.33, pp. 203-204. Recuperado de: https://www.redalyc.org/pdf/849/84903353.pdf.

Ballester, A., Arias, A. M., Cobián, B., Calvo, E. L., & Vieitez, E. (2011). Estudio de potenciales alelopáticos originados por Eucalyptus globulus Labill., Pinus pinaster, y Pinus radiata D. Pastos, vol.12, no. 2, pp. 239-254. Recuperado de: http://polired.upm.es/index.php/pastos/article/view/818.

Blanco Yasis. (2006). La utilización de la alelopatía y sus efectos en sus diferentes cultivos agrícolas. Cultivos Tropicales, vol.27, no. 3, pp. 5-16. Recuperado de: https://www.redalyc.org/pdf/1932/193215825001.pdf.

Calle Fernández, M. (2010). Control de la germinación in vitro de Araujiasericifera con aceites esenciales de Laurusnobilis, Myrtuscommunis, Citrus sinensis y Citrus limon (Doctoral dissertation, Tesis para optar el título de máster en producción vegetal y ecosistemas agroforestales). Valencia: Universidad Politécnica de Valencia. Recuperado de: https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/11348/Control_de_la_germinaci%C3%B3n.pdf

Chludil Hugo D. (2017). Compuestos químicos. Ciencia hoy, no.153. Recuperado de https://cienciahoy.org.ar/2017/02/compuestos-aleloquimicos/.

Murillo, W., Quiñones, W., & Echeverri, F. (2005). Evaluación del efecto alelopático de tres especies de Eucalyptus. Actualidades Biológicasvol. 27, no.1, pp. 105-108.

Reigosa, M. J., Pedrol, N., & González, L. (2006) Allelopathy: A physiological process with ecological implications. Springer

Silva, E. R., Lazarotto, D. C., Schwambach J., Overbeck, G. E., & Soares, G. L., (2017) Phytotoxic effects of extract and essential oil of Eucalyptus saligna (Myrtaceae) leaf litter on grassland species. Australian Journal of Botany, 65, pp.172-182

Servicio de Información Agroalimentaria y Pesquera (2018, mayo 07). En 2017, México exportó 37 mil 571 toneladas de rábano. Gobierno de México. Recuperado de:  https://www.gob.mx/siap/articulos/en-2017-mexico-exporto-37-mil-571-toneladas-de-rabano?idiom=es.

Willis, R. J. (2008). The History of Allelopathy, (recurso electrónico). Springer http://aleph.dgse.uaa.mx/F/?func=find-b&request=000152320&find_code=SYS